库欣综合征的诊断依据包括：①临床表现：出现向心性肥胖、满月脸、多血质外貌、宽大紫纹、痤疮、高血压、糖耐量异常等特征性表现；②实验室检查：24小时尿游离皮质醇升高、血浆皮质醇昼夜节律消失、小剂量地塞米松抑制试验无法被抑制；③影像学检查：可发现垂体腺瘤、肾上腺增生或肿瘤等原发病灶。
库欣综合征诊断流程包括
1.定性筛查试验
该试验为初步筛选是否存在皮质醇分泌异常的基础检查，常用项目包括24小时尿游离皮质醇UFC测定、午夜唾液皮质醇测定、小剂量地塞米松抑制试验LDDST，通过检测上述指标的异常改变如午夜唾液皮质醇升高、24小时UFC高于参考值上限、小剂量地塞米松后皮质醇未被抑制，初步判断是否符合库欣综合征的生化表现。
2.定性确诊试验
若筛查试验结果异常，需进一步行精准确诊，核心项目包括皮质醇节律测定、大剂量地塞米松抑制试验HDDST：库欣综合征患者通常正常皮质醇的昼夜节律清晨高、夜间低消失；HDDST则通过用药后皮质醇是否被抑制，辅助明确是否为可抑制性的皮质醇增多类型。
3.病因定位诊断
确诊皮质醇增多后，需明确致病病因，常用手段包括血浆促肾上腺皮质激素ACTH测定、影像学检查垂体/肾上腺CT或MRI：ACTH升高提示ACTH依赖性库欣如垂体库欣病、异位ACTH综合征，ACTH降低提示ACTH非依赖性库欣肾上腺来源；必要时可行双侧岩下窦静脉取血BIPSS精准定位垂体来源病变。
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