土拉菌病的诊断依据主要包括三方面：一是流行病学史，发病前1~2周有接触林区、草原等疫区、被蜱等吸血昆虫叮咬或接触野兔等啮齿类动物及其污染物史；二是临床表现，出现皮肤溃疡、局部淋巴结肿大、不明原因发热等特征性表现；三是实验室检查，从病灶分泌物、血液等标本中分离出土拉弗朗西斯菌，或血清特异性抗体滴度恢复期较急性期升高≥4倍，或PCR检测该菌核酸阳性。
土拉菌病诊断流程包括
1.临床初步评估
需详细询问流行病学暴露史，如是否去过土拉菌病流行疫区、有无接触啮齿类动物野兔等、被节肢动物蜱、鹿蝇等叮咬史，同时结合典型临床症状如发热、局部皮肤溃疡伴淋巴结肿痛、呼吸道症状、头痛乏力等，初步怀疑本病可能。
2.实验室初筛检查
开展常规血液学检查，可见白细胞计数正常或轻度升高、淋巴细胞比例异常等非特异性炎症表现；进一步行血清学初筛，采用间接免疫荧光法等检测血清特异性抗体，急性期血清特异性IgM抗体阳性或恢复期IgG抗体滴度较急性期升高4倍及以上，为重要的初筛依据。
3.病原学确诊检查
采集患者溃疡分泌物、血液、痰液等标本，进行土拉弗朗西斯菌的分离培养，是诊断的金标准；也可采用实时荧光定量PCR技术检测标本中病原菌特异性核酸片段，快速明确病原，缩短诊断周期，尤其适用于早期诊断。
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