医生根据流行病学资料、临床表现、实验室检查来诊断本病。美国疾病控制与预防中心关于莱姆病的诊断标准有下列5项：有慢性游走性红斑。短暂或反复发作的非对称性关节肿和关节炎，淋巴细胞性脑膜炎，脑神经根炎（特别是面神经麻痹），神经根炎，脑脊髓炎。有流行病学暴露史，是指发病前30天内曾到过树林、灌木丛或草地等潜在性的蜱栖息地。曾去过流行区，指既往该地区至少有2例莱姆病确诊病例，或有蜱叮咬史者显示有蜱传播伯氏疏螺旋体感染的血清学证据。实验室检查可以从感染组织或体液中分离到伯氏疏螺旋体，或从血清、脑脊液中检测到高滴度特异性抗体或双份血清特异性抗体滴度有增高，并排除了梅毒和已知可引起假阳性的生物学原因。具备上述5项中3项或3项以上者即可诊断为莱姆病。