诊断佝偻病依据维生素D缺乏的病因、临床表现、血生化及骨骼X线检查。血生化与骨骼X线的检查为诊断的“金标准”，不论婴儿还是儿童，血浆25-OH-D3浓度应当≤50nmol/L （20ng/mL）。